Princípio ADA do kit de ensaio de adenosina desaminase (método glutamato desidrogenase)

No campo do diagnóstico médico moderno, a medição de indicadores bioquímicos desempenha um papel vital no diagnóstico, tratamento e avaliação do prognóstico de doenças. Entre eles, adenosina desaminase (ADA), como importante marcador enzimático, desempenha papel indispensável no diagnóstico de diversas doenças. A ADA geralmente é medida usando um kit específico. Aqui apresentamos em detalhes o princípio do Kit de Ensaio de Adenosina Deaminase ADA baseado no método da glutamato desidrogenase.

1. O significado fisiológico da ADA
A ADA é uma enzima amplamente presente em diversos tecidos do corpo humano, principalmente nos linfócitos. Está principalmente envolvido no processo metabólico da adenosina, convertendo a adenosina em inosina e amônia. Sob condições fisiológicas normais, a actividade da ADA permanece num nível relativamente estável. Contudo, quando certas doenças ocorrem no corpo humano, a atividade da ADA muda. Por exemplo, em doenças como pleurisia tuberculosa, hepatite e cirrose, a atividade da ADA aumentará significativamente.

2. Princípio do kit de determinação ADA
O princípio do kit de ensaio ADA (método da desidrogenase do ácido glutâmico) baseia-se na catalisação da desaminação da adenosina pela ADA para gerar inosina e amônia e, em seguida, usando a glutamato desidrogenase para converter amônia em glutamato, produzindo simultaneamente NADH. O NADH tem uma absorvância característica no comprimento de onda de 340 nm. Ao medir a alteração na absorvância, a atividade do ADA pode ser calculada indiretamente.
Especificamente, o kit contém substrato de reação adenosina, coenzima NADH, glutamato desidrogenase e outros reagentes necessários. Durante a reação, a ADA catalisa a desaminação da adenosina para gerar amônia, que reage com o α-cetoglutarato sob a ação da glutamato desidrogenase para gerar glutamato, enquanto consome NADH. Medindo a alteração da absorvância do NADH antes e depois da reação, a atividade do ADA pode ser calculada.

O kit de determinação de ADA (método de desidrogenase do ácido glutâmico) é um método de determinação de ADA sensível, preciso e conveniente. Baseia-se no princípio de que o ADA catalisa a desaminação da adenosina para gerar amônia e calcula a atividade do ADA medindo a alteração da absorvância do NADH. Este kit tem amplas perspectivas de aplicação na medicina clínica e é de grande importância para melhorar a precisão diagnóstica de doenças, orientando o tratamento e avaliação do prognóstico.