NEFA Assay Kit é uma ferramenta para a quantificação de NEFA

Kit de ensaio NEFA é uma ferramenta para a quantificação de NEFA (Óxido Nítrico). É usado para determinar a concentração de AGNE em amostras de sangue ou tecido. NEFA é um nutriente vital responsável pela regulação do metabolismo energético, excitabilidade cardíaca, condução neuromuscular, pressão arterial e coagulação sanguínea. É encontrada principalmente nos ossos, músculos, tecidos moles e glóbulos vermelhos.

Preparação

NEFA é uma pequena proteína de 50,2 kDa que tem a capacidade de se ligar ao DNA. É um complexo citosólico de ácido graxo sintase (FAS) tipo I que produz ácido palmítico não esterificado. Na presença de Acil-CoA oxidase (ACS), o complexo FAS oxida 3-metil-N-etil-N-(b-hidroxietil)-anilina em 4-aminoantipirina, que é o precursor molecular da acetil-CoA. Este processo é um processo enzimático crucial para todos os organismos eucarióticos.

Embora os NEFA possam não ter a massa robusta de uma gordura, são uma importante fonte de combustível para os tecidos periféricos. É metabolizado pelo fígado e transportado complexado com a albumina para os tecidos periféricos. NEFA também é liberado por um domínio tioesterase (TE) do complexo FAS.

Pipetagem

Os kits ELISA são usados ​​para detectar pequenos compostos químicos, proteínas e peptídeos. Estes kits são baseados em proteínas recombinantes expressas em E.coli. Os kits não contêm azida, timerosal e outros recursos naturais.

No kit estão reagentes como BSA, tampão de diluição apirogênico e solução de lavagem. A solução de lavagem é estável durante duas semanas a 2-8°C. O tampão de diluição contém solução salina fisiológica a 0,9%.

O kit possui um padrão NEFA interno. Isto é enriquecido com NEFA em uma concentração que corresponde à concentração esperada na amostra. A absorvância do pigmento azul-púrpura a 546 nm é medida para calcular a concentração de NEFA na amostra.

Colorimétrico

O uso do kit WAKO NEFA gerou uma variedade de resultados, incluindo alguns que são absurdos. No entanto, o kit NEFA é um candidato digno quando se trata de determinar o teor relativo de ácidos graxos em amostras de tecido animal. Como tal, o kit NEFA é um dos testes laboratoriais mais populares. O kit vem com instruções para testar diferentes tipos de amostras, incluindo sangue, soro, saliva e uma variedade de lipídios.

A parte mais interessante do kit é que ele pode ser usado para medir uma variedade de ácidos graxos, incluindo aqueles comumente encontrados em lipídios. O kit vem com uma variedade de enzimas projetadas para detectar uma variedade de ácidos graxos, incluindo os ácidos graxos C-8 e C-16 encontrados em humanos e animais. No entanto, o kit não é recomendado para uso em concentrações de AGL de alta precisão em uma ampla faixa.

Eletroquímico

Os AGNE são ácidos graxos importantes para a saúde humana, mas raramente são avaliados. Além disso, a sua detecção é muito dispendiosa. Portanto, monitorar as mudanças em suas concentrações pode ajudar na prevenção e no manejo mais preciso de doenças. Neste estudo, foi desenvolvido um kit de ensaio eletroquímico para NEFA, utilizando PDA-MWCNT como superfície do sensor. Este eletrodo exibiu boa atividade eletrocatalítica para etapas de oxidação de NEFA e poderia ser usado em aplicações da vida real.

O eletrodo enzimático consistia em um filme compósito multicamadas de PDA-MWCNT e ACOD, ACS e polímero. A ordem das camadas foi escolhida para corresponder à ordem da reação enzimática. Foi determinado que o ACS e o ACOD permaneceram biologicamente ativos no filme.

Concentração de NEFA em DM2

As concentrações de AGNE no sangue foram estudadas no contexto da obesidade e da hipertensão. Foi demonstrado que esses compostos promovem a elevação da PA por meio da estimulação a1-adrenérgica e aumentam o estresse oxidativo. Os NEFAs também estão associados à síndrome metabólica. Esses compostos podem ser importantes no desenvolvimento da hipertensão.

Vários modelos foram propostos para descrever a resposta plasmática de NEFA a um desafio intravenoso de glicose. O modelo de Boston retratou com precisão a quarta fase do aumento da concentração de NEFA. No entanto, o modelo não descreveu a fase inicial de latência. O modelo Fabian empregou uma inclinação exponencial simples para descrever esta fase. Da mesma forma, o modelo Thomaseth não foi capaz de descrever a fase de recuperação.

Níveis de NEFA em triglicerídeos

Vários estudos investigaram os efeitos da cirurgia bariátrica na composição plasmática de NEFA. Numa meta-análise publicada em 2016, os níveis séricos de NEFA diminuíram 6 e 12 meses após a cirurgia. Isto pode ter sido devido à redução dos níveis de insulina. Em outro estudo, os NEFAs plasmáticos foram medidos em um grupo de pacientes obesos antes e depois da cirurgia de bypass gástrico em Y-de-Roux.

As concentrações de sete NEFAs diminuíram nove meses após a cirurgia. O linoleato (um ácido graxo ômega-6) foi reduzido em 18:2, o estearato em 18:0 e o oleato em 16:0. A concentração de docosahexaenoato, contudo, não foi afetada. NEFAs foram convertidos em ésteres metílicos de ácidos graxos (FAMEs). Estes foram então analisados ​​​​por cromatografia gasosa-espectrometria de massa (GC-MS).