Sobre o kit de ensaio de lactato desidrogenase

Um kit de ensaio de lactato desidrogenase (LDH) fornece um método altamente sensível e rápido para medir a atividade de LDH. A enzima reage com uma sonda específica para formar uma cor. Os kits de ensaio de atividade LDH podem detectar níveis de um a cem mU/mL. O teste leva menos de 30 minutos para ser concluído. Eles também são adequados para análises de alto rendimento.

A lactato desidrogenase (LDH) é uma enzima citosólica solúvel

LDH é uma enzima citosólica que catalisa a síntese de lactato e piruvato no corpo. Suas concentrações no corpo podem ser indicativas de danos celulares e são comumente usadas como biomarcadores. A atividade do LDH foi maior no EDL, seguido pelo diafragma, e menor no SOL. Havia cinco isoenzimas diferentes no soro e cada músculo continha um padrão específico de isoenzimas LDH. O EDL foi o mais abundante, contendo alta proporção de LDH-5, enquanto o diafragma apresentou a menor atividade.

O LDH é liberado das células quando a integridade da membrana plasmática é comprometida. Em contraste, a apoptose envolve a quebra articulada de uma célula em corpos apoptóticos ligados à membrana. Esta enzima também é uma medida geral da permeabilidade da membrana plasmática. O ensaio de citotoxicidade LDH-Glo(tm) fornece um método bioluminescente simples para quantificar os níveis de LDH em amostras com baixa contagem de células, como esferóides de microtecidos 3D, células primárias e células-tronco.

A atividade do LDH é influenciada pelo pH. Nesta experiência, a actividade de LDH foi medida em meio GTSF-2 (pH 7,4-7,2), e as barras de erro representam erros padrão. Para n = 4 células, diferenças significativas foram determinadas pelo teste dos postos sinalizados de Wilcoxon ou pelo teste t de uma amostra. Uma vez corrigido o equilíbrio do pH, a atividade do LDH aumenta nas células e o nível de glicose celular diminui.

É um indicador confiável da viabilidade celular

O número de células viáveis ​​em uma amostra é um indicador da viabilidade celular. A viabilidade celular desempenha um papel fundamental em todas as formas de cultura celular. Ensaios de viabilidade celular também são usados ​​para correlacionar o comportamento celular com o número de células viáveis. Os ensaios de viabilidade celular são populares na indústria farmacêutica, onde os pesquisadores usam uma variedade de métodos para rastrear terapêuticas para uma variedade de doenças. Muitas terapêuticas desenvolvidas têm como alvo as células cancerígenas.

Este kit de ensaio é fácil de usar, barato e oferece resultados reproduzíveis. Elimina a necessidade de preparação manual e é adequado para placas de 96 e 384 poços. O kit de ensaio inclui todos os reagentes necessários, incluindo uma placa de 96 poços. O kit também inclui um protocolo que contém instruções detalhadas. A citometria de fluxo é uma excelente escolha para determinar a viabilidade celular em laboratório.

O kit de viabilidade de células azuis Alamar está disponível na Bio-Rad e Thermo Fisher Scientific. O reagente de ensaio de viabilidade celular G-Biosciences Alamar blue e o reagente de ensaio Cell-Quant AlamarBlue também estão disponíveis. Você também pode verificar a viabilidade das células criopreservadas com este kit. Você deve considerar o tipo de célula antes de descongelar as células criopreservadas. Também é importante usar o reagente de ensaio apropriado para o tamanho da célula.

É testado e validado

A importância de validar um teste diagnóstico não passa despercebida aos médicos. Validação significa a tomada de decisão com base em uma interpretação particular dos dados de uma avaliação. Os testes de diagnóstico são valiosos apenas quando influenciam as decisões e se o teste leva a mudanças significativas no tratamento de um paciente. Os médicos são ensinados a evitar solicitar exames que não alterem o manejo. Um excelente exemplo de validação de um teste é o teste PSA, que é altamente confiável e fortemente associado ao diagnóstico de câncer de próstata.